Патологический материал, направляемый в ветеринарную лабораторию для разных видов исследования инфекционных болезней птиц
Упаковка и пересылка патологического материала. Трупы павшей птицы и отдельные органы, направляемые в свежем (нефиксированном) виде для исследования в лаборатории, доставляют только нарочным. Посылаемый материал должен быть тщательно упакован в плотный деревянный или металлический ящик, чтобы предотвратить всякую возможность рассеивания возбудителей инфекции в пути. Перед упаковкой трупы завертывают в ткань (холст, мешковину), смоченную дезинфицирующим раствором, и укладывают в ящик со стружкой или опилками.
Если патологический материал получен от птиц, подозреваемых в заболевании особо опасными болезнями (чума, НБ, ИБК, оспа, хламидиоз и др.), его, после заключения в стеклянную посуду, помещают в металлическую коробку, которую запаивают, пломбируют или опечатывают, а затем упаковывают в деревянный ящик. На лицевой стороне ящика вверху делают надпись: «Осторожно, стекло» и «Верх».
В сопроводительной записке для ориентации направлений исследований необходимо кратко и чётко изложить эпизоотическую ситуацию: динамику заболеваемости, летальности, поражаемый возраст, скорость распространения болезни, клинический и патологоанатомические признаки, сроки вакцинации и против каких болезней. Ориентировать ветлабораторию только на подозреваемую болезнь.
Тема: Эпизоотологическое обследование птицеводческого предприятия.
Эпизоотологический анализ
Цель занятия: изучить методы эпизоотологического исследования птицеводческих предприятий.
Задание для самостоятельной работы:
- провести эпизоотологическое обследование птицефабрики и составить акт;
- по данным акта провести эпизоотологический анализ.
Источник
Лабораторная диагностика бактериальных инфекций птиц
Для диагностики бактериальных инфекций птиц применяют бактериологическое исследование, а также – экспресс-методы и серологические исследования, реже — аллергические исследования (чаще при туберкулезе, орнитозе).
Экспресс-методы и серологические методы диагностики в основе своей аналогичны таковым при диагностике вирусных инфекций. Из экспресс-диагностики чаще применяются различные методы МФА, генетические методы – ПЦР. Из серологических методов – РА, РСК, РИД (РДП), РН.
Бактериологический метод исследования основан на обнаружении возбудителя в патологическом материале, изоляции чистой культуры и его идентификации. Для обнаружения бактерий используют световую, люминисцентную микроскопию, для чего готовят бактериологические препараты, изучая морфологию бактерий в живом состоянии («раздавленная капля», «висячая капля») и неживом состоянии (в окрашенных бактериальных препаратах).
При этом способы окраски подразделяют на ориентировочные и дифференциальные, а в некоторых случаях и диагностические.
Для изоляции чистой культуры и идентификации бактерий используются питательные среды, которые различают общеупотребительные и специальные, т.е. созданные либо для определенных видов микробов (микобактерий, микоплазм, микроскопических грибов, дрожжей и т.д.), либо для изучения различных биохимических свойств, либо для дифференциации одних видов бактерий от других.
При бактериологическом методе применяют биопробу — чаще на цыплятах, КЭ, с целью обнаружения возбудителя в патологическом материале, выделения его в чистой культуре и определения патогенных свойств чистой культуры микроорганизма.
Некоторые особенности имеет микоплазмотическое исследование (респираторный микоплазмоз) и микологическое (микотоксикологическое) исследование заболеваний, вызываемых микроскопическими грибами или их токсином (микозы, микотоксикозы).
Правила отбора патологического материала от птиц
Отбор материала для различных методов исследования – один из важных этапов диагностической работы. Материал берут для лабораторного исследования с учетом предварительного диагноза. Необходимо взять его как можно раньше, после гибели птицы (не более 1-2 часов) и быстро транспортировать в лабораторию. От этого зависит достоверность результатов исследования. Труп в состоянии разложения не пригоден для лабораторного исследования. Материал берется с учетом характерных изменений у птиц 3-х групп:
— птиц, погибших в результате болезни;
— птиц, находящихся в разгаре болезни;
Отбирают органы в достаточном количестве, наиболее пораженные возбудителем болезни, с учётом клинической картины болезни и соблюдением требований целевых исследований: патологоанатомического, гистологического, гематологического, вирусологического, бактериологического, серологического, токсикологического.
Материал можно консервировать, учитывая свойства возбудителя и методы исследования. Для бактериологического, вирусологического исследования можно консервировать в смеси 100 весовых частей льда и 33 части поваренной соли или заморозкой. Из химических консервантов используют смесь равных объемов стерильного глицерина и 0,85% NaCl.
Для исследования в МФА – консервация материала глицерином не допускается.
Для гематологии кровь берут в пробирку с антикоагулянтом – 10% раствором трилона Б, гепарина.
При несоответствии качества отобранного материала утвержденным требованиям лаборатория может потребовать его повторную доставку. Нужно помнить, что некоторые вирусы быстро разрушаются в крови, моче, смывах с носоглотки, а некоторые – и в замороженном состоянии.
В лаборатории исследования присланного материала должно быть начато как можно скорее. Патматериал освобождают от консервантов, делят на 2-3 порции, при необходимости — часть отдают для других видов исследований.
Приняв во внимание содержание сопроводительного письма, качество материала, составляют план исследований. Предусматривают изучение материала не менее, чем двумя методами, с расчетом, чтобы получить по возможности быстрый ответ.
Готовят из патматериала срезы, отпечатки, мазки, суспензию, в зависимости от предполагаемых методов исследования.
О нахождении инфекционного очага в организме птицы могут свидетельствовать как бактерии и вирусы или вирусные тельца включения, так и специфические антитела.
Источник
Лабораторная диагностика и её принципы
При инфекционных болезнях птиц особенно велика роль лабораторной диагностики, так как при многих из них наблюдают сходные эпизоотологические данные, клинические симптомы и патологоанатомические изменения. Нередки в настоящее время случаи атипичных и латентных форм течения болезней, а также наличие смешанных инфекций, когда болезнь вызвана не одним, а двумя и более этиологическими агентами (например, двумя вирусами или вирусом и бактериями и т.д.).
Окончательный диагноз на вирусную болезнь в большинстве случаев может быть поставлен только с учетом результатов лабораторных исследований.
Лабораторная диагностика основывается на ряде принципов:
— первый принцип диагностики – составление исчерпывающих записей по наблюдаемым в хозяйстве болезням птиц.
— второй принцип – максимально использование доступных методических приемов исследования больной птицы (изготовление мазков крови, кляч-препаратов, мазков из измененной ткани внутренних органов, содержимого трахеи, желудка, разных отделов кишечника, помета и т.д.). Прямое микроскопическое исследование таких препаратов позволяет получить данные об изменении картины крови, присутствии в мазках и кляч-препаратах клеточных включений, гельминтов, ооцист кокцидий, бактерий, грибов и т.д. Второй принцип диагностики предусматривает использование прямого и непрямого вариантов МФА при исследовании мазков из патологического материала от больной птицы или зараженных куриных эмбрионов (КЭ) и культуры клеток. Зачастую сначала заражают КЭ или культуру клеток, затем материал, взятый из нее, исследуют с помощью МФА.
Обнаружение специфического антигена подтверждается результатами гистологического и электронно-микроскопического исследований. После этого решают вопрос о дальнейшем исследовании с целью выделения и идентификации вирусов.
— третий принцип диагностики сводится к выделению и идентификации возбудителя болезни. При реализации этого принципа следует учитывать следующее: выделенный и идентифицированный вирус при вспышке болезни не обязательно является возбудителем болезни; окончательный результат получают при выделении этого вируса от аналогичного хозяина, зараженного ранее выделенным возбудителем. Далее необходимо провести специфическую идентификацию повторно выделенного вируса и определить его связь с клинической картиной болезни. Чаще для идентификации применяют иммуносерологические тесты.
— четвертый принцип. Для постановки правильного диагноза необходимо учитывать наличие в образцах патологического материала смешанной инфекции (аденовирусной, ИББ, лейкоз, респираторный микоплазмоз), т.е., дифференцирование возбудителей.
— пятый принцип – серологические исследования вирусных инфекций с целью обнаружения специфических антител – наиболее доступный метод лабораторной диагностики.
Систематические исследования парных проб сыворотки (т.е. пробы берутся в разные сроки, 2-3 недели, от одних и тех же особей) с заведомо известными стандартными антигенами при учете комплекса других данных способствует своевременному выявлению и принятию мер борьбы с инфекцией.
Источник