ОБЩАЯ И ПИЩЕВАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ ЧАСТЬ II — Л. В. Красникова — 2016
Птицеперерабатывающие предприятия выпускают мясо птицы в виде потрошеных тушек, обваленное (освобожденное от костей) и измельченное. В розничную торговлю поступают субпродукты (шея, крылья, головы, ноги), а также птичьи потроха (печень, сердце, желудок). Мясо птицы контаминируется микроорганизмами прижизненно, после убоя, ошпаривания, удаления оперения, потрошения и охлаждения. Массивное обсеменение тушек микроорганизмами может происходить в ваннах охлаждения, при этом доминируют бактерии родов Salmonella и Campylobacter. В процессе хранения среди поверхностной микрофлоры обнаруживаются кишечные палочки, псевдомонады, протеи, клостридии и др.
Бактериологическому исследованию подлежат птицепродукты во всех случаях, предусмотренных действующей нормативнотехнической документацией (НТД). При сомнении в свежести мяса птицы хотя бы по одному показателю его направляют на бактериологический анализ. Исследование проводят также в случаях, если обнаружены патологоанатомические изменения в отдельных органах и тканях птицы. Особое внимание уделяют исследованию мяса птицы
при подозрении на присутствие возбудителей кишечных инфекций, пищевых токсикозов или токсикоинфекций.
6.1. Отбор и подготовка проб
Для проведения бактериологического контроля отбирают по три образца тушек птиц, птичьих полуфабрикатов, субпродуктов. Каждый из них упаковывают в пергаментную бумагу, целлофан или полиэтиленовую пленку, опечатывают, пломбируют и составляют акт в соответствии с НТД. Пробы хранят не более 24 ч при температуре 0-2 °С с момента их отбора до начала исследований.
Для контроля качества тушек или полутушек вырезают из области грудной части, голени и бедра куски в равных количествах общей массой не менее 150 г. Измельчают образец в гомогенизаторе в течение 2,0-2,5 мин (или в фарфоровой ступке) и получают объединенную пробу одной тушки или полутушки. Из объединенной пробы отбирают навеску массой не менее 10 г.
Для исследования микробной обсемененности поверхности тушек пробы отбирают смоченным ватным тампоном с определенной площади при помощи трафарета или путем смыва стерильной жидкостью (физиологический раствор).
Бактериологический анализ птицепродуктов проводят на КМАФАнМ, БГКП, наличие сульфитредуцирующих клостридий (Clostridium perfringens), сальмонелл, золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus), протея (Proteus) (см. разделы 1.3.2-1.3.5).
6.2. Определение КМАФАнМ
Для определения КМАФАнМ из подготовленной навески измельченного продукта или смыва с поверхности тушки готовят исходное и ряд последующих десятикратных разведений до такой степени, чтобы можно было учесть предполагаемое количество микроорганизмов в 1 г исследуемого продукта или на 1 см 3 поверхности тушки. Из последних разведений (10 -5 — 10 -6 ) высевают по 1 см 3 суспензии одновременно в две чашки Петри, после чего их заливают расплавленным МПА с температурой не выше 45±1 °С. Питательную среду тщательно перемешивают и после застывания агара чашки помещают в термостат с температурой 37±1 °С. После инкубации подсчитывают число выросших на чашких колоний и определяют КМАФАнМ с учетом засеянных разведений.
1. Определить микробную обсемененность поверхности тушки птицы.
2. Определить наличие БГКП на поверхности тушки птицы.
1. Как проводят отбор проб мяса птицы и их подготовку для бактериологического контроля?
2. Какие группы микроорганизмов учитывают при микробиологическом исследовании мяса птицы?
3. Каким образом происходит контаминация тушек птицы микроорганизмами?
Источник
Как происходит диагностика инфекций у птиц при лечении он-лайн.
Когда владелец попугая замечает, что с его питомцем что-то не так, снижается активность, аппетит или появляются изменения в помёте, это может означать только одно: в организме птицы есть инфекция. Зачастую – целый комплекс различных инфекций.
Эта статья про виды диагностики, которые помогают исключить конкретные инфекции или просто проверить на их наличие птицу перед покупкой или сразу после приобретения.
Кстати, о полном скрининге перед покупкой давно существует обстоятельная статья Валентина Козлитина : Какие анализы нужно делать перед покупкой попугая или сразу после покупки.
Я ознакомлю вас с процессом сбора материла и сдачи анализов.
Если это не обследование до/после приобретения, и имеются вопросы к поведению или здоровью птицы, то какие конкретно инфекции нужно исключать, должен решать врач, опираясь на клинические признаки и картинку по обзорному рентгену птицы. Это в идеале. На практике, зачастую, к врачу обращаются с птицей в запущенном состоянии, когда даже рентген не сделать из-за плохого состояния пациента. Первоначальная задача – стабилизовать из тяжелого состояния, а уже потом заниматься диагностикой. Если птица в критическом состоянии, об анализах тоже, как правило, речь не идет: их можно будет отправить после стабилизации состояния.
Анализы, которые я рутинно использую в своей практике лечения пернатых – это бактериологическое исследование на бактерии и грибки и ПЦР-метод. Последний применяется для выявления инфекций, которые на питательных средах не растут и бактериологией не обнаруживаются, даже если их в организме огромное количество.
Существует два варианта, куда сдавать анализы. Один – местный, если в городе есть городская ветеринарная лаборатория. Второй и часто самый лучший вариант – отправить материал в частную лабораторию в другой город любой транспортной компанией.
Если есть сомнения в надежности местной лаборатории, лучше сразу направлять в частную. Я буду описывать, как это происходит, на примере лаборатории «Шанс Био» в Москве. Она делает исследования на практически все возможные ПЦР-инфекции (кроме мегабактериоза, криптококкоза и ряда вирусных инфекций птиц).
Можно отправлять в лабораторию «Поиск» в Питере или лабораторию «Зайцев +» в Москве (где как раз можно попробовать «поймать» мегабактериоз методом ПЦР). Частных лаборатории сейчас много. Я называю те, которыми пользуюсь в своей практике, чьи результаты отслеживаю не один год, и могу дать обратную связь.
Также хочу отметить, что не стоит сдавать бакпосев в человеческие лаборатории и в лабораторию “Vet Union”, так как в своих результатах посева эти лаборатории указывают только патогенные бактерии, а патогены для человека, животных и птиц совершенно разные, нам для птиц важен рост любой бактерии!
Теперь о том, как собрать помет и в чем отправлять его в лабораторию.
Если речь идет о бактериологическом исследовании (бакпосев), важно соблюдать стерильность. Поэтому поддон клетки мы предварительно моем и обрабатываем кипятком. А помет помещаем либо в стерильную тару для кала, если лаборатория в городе, либо в специальную пробирку с любой транспортной средой (среда ЭЙМСА, стюарт или Амиес). Важно, чтобы помет находился в контакте с внешней средой минимум времени и сразу был перенесен в бакпробирку или тару для кала. В случае с бакпробиркой мы размазываем свежайший помет ватным кончиком тупфера и помещаем в среду, и несем в транспортную компанию для отправки материала в лабораторию.
Если материл нужен для ПЦР диагностики, то опять же на большинство инфекций актуально собрать помет. А на некоторые инфекции делать это в течении нескольких дней (2-3 дня) для бОльшего объема и выборки образца. Отправлять его можно как в стерильной баночке для анализа кала, так и в шприце.
Но и то, и другое должно быть плотно закрыто, а чтобы материал не высох во время транспортировки, добавить вместе с помётом 1 максимум 2 капли воды или физ раствора.
Отправляем пробирки для бакпосева и помет для ПЦР частной транспортной компанией, но далеко не все транспортные компании принимают биоматериал для отправки. Иногда мы вынуждены маскировать тару с помётом под что-то другое. Если требуется маскировка материала, практичнее положить его в стерильный шпиц на 3 миллилитра, так как его будет проще вложить куда-то, чем тару для кала.
На сайте лабораторий обычно представлена информация по определенным срокам доставки, в которые надо уложится, плюс температурный режим. Это своего рода подстраховка. Однако, как показывает практика, сроки доставки даже в несколько недель не сильно влияют на результаты для птичьих анализов. Мои пациенты отправляют анализы в столицу и из Приморского края, и даже с Сахалина. Идут анализы долго, но несмотря на это всегда удается определить возбудителей.
На этом, пожалуй, всё. Порядок оплаты и форма заполнения бланка у всех лабораторий индивидуальны, и стоит уточнить эти моменты в конкретной лаборатории до отправки материала.
Источник
Лабораторная диагностика бактериальных инфекций птиц
Для диагностики бактериальных инфекций птиц применяют бактериологическое исследование, а также – экспресс-методы и серологические исследования, реже — аллергические исследования (чаще при туберкулезе, орнитозе).
Экспресс-методы и серологические методы диагностики в основе своей аналогичны таковым при диагностике вирусных инфекций. Из экспресс-диагностики чаще применяются различные методы МФА, генетические методы – ПЦР. Из серологических методов – РА, РСК, РИД (РДП), РН.
Бактериологический метод исследования основан на обнаружении возбудителя в патологическом материале, изоляции чистой культуры и его идентификации. Для обнаружения бактерий используют световую, люминисцентную микроскопию, для чего готовят бактериологические препараты, изучая морфологию бактерий в живом состоянии («раздавленная капля», «висячая капля») и неживом состоянии (в окрашенных бактериальных препаратах).
При этом способы окраски подразделяют на ориентировочные и дифференциальные, а в некоторых случаях и диагностические.
Для изоляции чистой культуры и идентификации бактерий используются питательные среды, которые различают общеупотребительные и специальные, т.е. созданные либо для определенных видов микробов (микобактерий, микоплазм, микроскопических грибов, дрожжей и т.д.), либо для изучения различных биохимических свойств, либо для дифференциации одних видов бактерий от других.
При бактериологическом методе применяют биопробу — чаще на цыплятах, КЭ, с целью обнаружения возбудителя в патологическом материале, выделения его в чистой культуре и определения патогенных свойств чистой культуры микроорганизма.
Некоторые особенности имеет микоплазмотическое исследование (респираторный микоплазмоз) и микологическое (микотоксикологическое) исследование заболеваний, вызываемых микроскопическими грибами или их токсином (микозы, микотоксикозы).
Правила отбора патологического материала от птиц
Отбор материала для различных методов исследования – один из важных этапов диагностической работы. Материал берут для лабораторного исследования с учетом предварительного диагноза. Необходимо взять его как можно раньше, после гибели птицы (не более 1-2 часов) и быстро транспортировать в лабораторию. От этого зависит достоверность результатов исследования. Труп в состоянии разложения не пригоден для лабораторного исследования. Материал берется с учетом характерных изменений у птиц 3-х групп:
— птиц, погибших в результате болезни;
— птиц, находящихся в разгаре болезни;
Отбирают органы в достаточном количестве, наиболее пораженные возбудителем болезни, с учётом клинической картины болезни и соблюдением требований целевых исследований: патологоанатомического, гистологического, гематологического, вирусологического, бактериологического, серологического, токсикологического.
Материал можно консервировать, учитывая свойства возбудителя и методы исследования. Для бактериологического, вирусологического исследования можно консервировать в смеси 100 весовых частей льда и 33 части поваренной соли или заморозкой. Из химических консервантов используют смесь равных объемов стерильного глицерина и 0,85% NaCl.
Для исследования в МФА – консервация материала глицерином не допускается.
Для гематологии кровь берут в пробирку с антикоагулянтом – 10% раствором трилона Б, гепарина.
При несоответствии качества отобранного материала утвержденным требованиям лаборатория может потребовать его повторную доставку. Нужно помнить, что некоторые вирусы быстро разрушаются в крови, моче, смывах с носоглотки, а некоторые – и в замороженном состоянии.
В лаборатории исследования присланного материала должно быть начато как можно скорее. Патматериал освобождают от консервантов, делят на 2-3 порции, при необходимости — часть отдают для других видов исследований.
Приняв во внимание содержание сопроводительного письма, качество материала, составляют план исследований. Предусматривают изучение материала не менее, чем двумя методами, с расчетом, чтобы получить по возможности быстрый ответ.
Готовят из патматериала срезы, отпечатки, мазки, суспензию, в зависимости от предполагаемых методов исследования.
О нахождении инфекционного очага в организме птицы могут свидетельствовать как бактерии и вирусы или вирусные тельца включения, так и специфические антитела.
Источник