Грипп птиц болезнь ньюкасла
6.9. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ БОЛЕЗНИ НЬЮКАСЛА И КЛАССИЧЕСКОЙ ЧУМЫ ПТИЦ (ГРИППА ПТИЦ)
УТВЕРЖДЕНЫ 1 февраля 1972 г.
1. Болезнь Ньюкасла (синоним — псевдочума) птиц и классическая чума птиц (синоним — грипп птиц) — высококонтагиозные болезни птиц, сопровождающиеся высокой летальностью. Ввиду большого сходства клинических признаков, патологических изменений и эпизоотических данных обеих инфекций их точно дифференцировать можно только лабораторными методами.
Выделение и типирование возбудителей болезни Ньюкасла и классической чумы птиц (гриппа птиц). Исследуемый патологический материал — 10%-ная суспензия селезенки (можно печени и мозга)
1. РГА с 1% эритроцитами кур
2. РЗГА с эталонными диагностическими сыворотками. Типирование закончено
3. Если п.1 отрицателен, выделяют вирус на куриных эмбрионах в разведениях 1:10, 1:1000
4. РГА с аллантоисной культурой вируса и 1% эритроцитами кур
5. РЗГА с эталонными диагностическими сыворотками. Типирование закончено
6. Если п.5 не внес ясности, поставить РЗГА с аллантоисной культурой, обработанной идентифицирующими растворами А и Б. Типирование закончено
7. Если п.6 не внес ясности, исключить двойную инфекцию постановкой РН с эталонными диагностическими сыворотками
8. Постановка РЗГА (п.6) с вирусом, полученным после РН. Типирование закончено
9. Если вирус не выделен в разведении 1:1000.
Необходимость типирования возбудителей этих болезней связана с особенностью их специфической профилактики.
2. Лабораторная диагностика болезни Ньюкасла и классической чумы птиц проводится путем:
— выделения возбудителя в развивающихся куриных эмбрионах;
— постановки биопробы на птице;
— типирования выделенного вируса в реакциях задержки гемагглютинации, нейтрализации и связывания комплемента;
— постановки дополнительных тестов (схема 1).
I. ВЫДЕЛЕНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЯ
3. Для выделения вирусов болезни Ньюкасла и классической чумы птиц требуется следующее;
— исследуемый материал — больная птица или трупы свежепогибших птиц или селезенка (печень, мозг, почки, легкие) от них;
— физиологический раствор рН 7,0. 7,3;
— стерильные ступки с пестиками;
— стерильный речной или стеклянный песок;
— стерильные пробирки бактериологические или пенициллиновые флаконы;
— стерильные пипетки на 1 и 5 мл;
— стерильные шприцы на 1 мл;
— термостат или инкубатор на 37°С;
— лабораторная центрифуга типа ЦЛ-1 или ЦЛ-3;
— лотки для куриных эмбрионов;
4. Из селезенки (печени, легких, мозга, почки) готовят 10%-ную суспензию на физиологическом растворе с соблюдением правил асептики. Для этого из исследуемого материала делают навеску в 1 г, помещают ее в стерильную ступку и растирают с небольшим количеством речного или стеклянного песка до получения гомогенной массы и затем добавляют 9 мл физиологического раствора, содержащего 100 ЕД/мл тетрациклин и 1:10000 тиомерсана (0,1 г на 1000 мл физраствора). Полученную массу еще раз тщательно растирают в ступке и переносят пипеткой в пробирку или пенициллиновый флакон.
Для освобождения взвеси от крупных частиц суспензию подвергают центрифугированию при 3000 об/мин 15 мин или отстаиванию при температуре от 0 до 4°С два часа.
В дальнейшем используют только надосадочную жидкость.
5. Из полученной надосадочной жидкости делают дополнительно разведение 1:1000 на физиологическом растворе.
Исследуемым материалом в разведениях 1:10 и 1:1000 заражают по 6 куриных эмбрионов (всего 12 эмбрионов).
Для заражения используют чистые куриные эмбрионы с белой скорлупой в возрасте 10 дней.
Перед заражением эмбрионы овоскопируют, отмечают пугу, положение зародыша, бессосудистую зону на боковой поверхности хорионаллантоисной оболочки. Затем эмбрионы обрабатывают спиртом с 0,1%-ным содержанием настойки йода и фламбируют.
Инструменты и шприцы перед работой стерилизуют кипячением и помещают в стерильные чашки Петри.
Для заражения эмбриона копьем в скорлупе пробивают отверстия в центре пуги и сбоку в бессосудистой зоне. Через боковое отверстие на глубину 0,2. 0,3 мм инокулируют разведения в объеме 0,1. 0,2 мл. Можно заражать эмбрионы и через пугу. Отверстия заливают расплавленным парафином. Зараженные эмбрионы помещают в термостат при температуре 37°С и овоскопируют 2 раза в день.
Погибшие эмбрионы вскрывают в день гибели, а оставшиеся живыми через 56. 72 ч после заражения охлаждают при 4°С в течение 12 ч и также вскрывают.
Перед вскрытием эмбрионов пугу обрабатывают 0,1%-ным спиртовым раствором настойки йода и фламбируют. После этого ножницами с изогнутыми браншами, направленными вверх, отделяют пугу, затем пинцетом снимают подскорлупную оболочку, делают надрыв хорионаллантоисной оболочки и пастеровской пипеткой отсасывают аллантоисную жидкость.
При вскрытии учитывают изменения эмбрионов. Характерными признаками поражения эмбрионов вирусом болезни Ньюкасла или классической чумы птиц считается гибель эмбрионов через 20. 76 ч в зависимости от вирулентности штамма вируса, с наличием множественных кровоизлияний на темени, теле и лапках зародыша.
От зараженных эмбрионов собирают аллантоисную жидкость в стерильные пробирки (из каждого разведения отдельно), которую проверяют на гемагглютинирующую активность и отсутствие бактериального загрязнения высевом на МПБ и МПА.
6. Если вирус обнаружен в разведениях 1:10 и 1:1000, следует считать причину гибели птицы установленной после того, как будет типирован возбудитель.
7. Типирование вируса болезни Ньюкасла и классической чумы птиц проводят в реакциях задержки гемагглютинации, и как исключение, в реакциях нейтрализации и связывания комплемента.
II. ПОСТАНОВКА БИОПРОБЫ
8. Постановку биопробы проводят только в сомнительных случаях (при отсутствии клинических признаков и патологоанатомических изменений у птиц или при выделении вируса из гомогенатов исследуемых органов только в разведении 1:10).
Биопробу проводят на неиммунной к болезни Ньюкасла или классической чуме птице того же возраста и породы, на которой установлено заболевание.
Перед постановкой биопробы птиц проверяют на отсутствие в крови антигемагглютининов (см. раздел III).
Четырем птицам (у которых не обнаружено в крови антигемагглютининов) внутримышечно вводят 10%-ную суспензию исследуемых органов или аллантоисную вируссодержащую жидкость. За зараженной птицей устанавливают наблюдение в течение 10 дней.
9. При наличии в исследуемом материале вирулентного вируса болезни Ньюкасла птица заболевает через 3. 7 дней после заражения и погибает через 1. 5 дней после начала заболевания, при классической чуме птица заболевает через 1. 5 дней после заражения и погибает через 10. 72 ч после проявления клинических признаков заболевания.
Источник
Грипп птиц. Болезнь Ньюкасла Грипп птиц (классическая чума птиц, экссудативный тиф, голландская чума кур).
Контагиозная болезнь, характеризуется угнетением, отеками, депрессией, протекает с различной степенью тяжести (от бессимптомной до тяжелых генерализованных форм септицемии). 2 формы:
Возбудитель – вирус семейства Ортомиксовиридэ рода Инфлюэнца. Существует 3 серотипа (А,В,С).
Для птиц наиболее патогенны вирусы H5 и H7.
Грипп зарегистрирован среди многих видов домашних и диких птиц, и патогенность вируса не ограничивается только тем видом, от которого он выделен. Заболеваемость 80-100%, смертность 10-90%, завист от вирулентности вируса и условий содержания.
В зависимости от вирулентности вируса, естественной вирулентности птицы развивается генерализованная или респираторная форма болезни. Попав на слизистые оболочки дыхательных путей, вирус активно размножается и попадает в кровь (4-12 часов).
- Активное размножение и накопление вируса в паренхиматозных органах;
- Вирусемия;
- Активное образование антител и прекращение дальнейшей репродукции вируса;
- Формирование иммунитета.
Вирус выделяет токсичные продукты, поэтому в стадию вирусемии происходит интоксикация и гибель птицы, обычно при остром течении.
Острое – отечность лицевой части сережек, гребень и бородки окрашены в темно-фиолетовый цвет;
Подострое, хроническое (10-25 дней) – наряду с респираторными симптомами возникает диарея, иногда атаксия, некрозы, судороги, манежные движения. При заражении низкопатогенными штаммами – легкое течение болезни без выраженных клинических признаков.
Варьируют в широких границах в зависимости от длительности течения болезни. Наиболее типичный признак – геморрагический диатез (подкожные отеки, содержащие желатинозный экссудат в области глотки , гортани, шеи, груди и ног. Отмечаются массивные единичные кровоизлияния под кожу, в мышцы, а также в паренхиматозные органы и слизистые оболочки, у кур несушек в яичник и яйцевод. У 45 % павших птиц ринит, фарингит, конъюнктивит, кровоизлияния в желудок и кишечник (60%). Редко возможны кровоизлияния в миокард.
Морфологические изменения зависят от тяжести болезни, в респираторных органах – катарально-геморрагическое воспаление слизистых оболочек, десквамация и гиперплазия покровного и железистого эпителия, застойные явления. При осложнении условно патогенной микрофлорой – очаговые некрозы слизистых оболочек, в кишечнике – кровоизлияния в слизистые оболочки, застойные явления в легких, печени, селезенке, истончение стенки кишечника за счет отторжения слизистой оболочки.
Генерализованную септицемическую форму – от болезни Нью-Касла, респираторную – от инфекционного бронхита, микоплазмоза, ларинготрахета.
Болезнь Ньюкасла (атипичная чума, псевдоэнцефалит)
Высококонтагиозная болезнь птиц отряда куриных, характеризуется поражением органов дыхания, ЖКТ, ЦНС.
Вирус из рода парамиксовирусов семейства парамиксовиридэ. В естественных условиях чаще регистрируют у кур, индеек, цесарок, фазанов, павлинов (отряд куриные). Описаны случаи заражения синантропных птиц (голуби, воробьи, сороки).
Вирус попадает с кормом, водой, воздухом, быстро проникает в кровь (через 96 часов). Под его действием нарушается проницаемость гематоэнцефалического барьера, развивается вирусемия (обширные и локализованные кровоизлияния в различные системы и органы). По кровяному руслу вирус может попадать в различные органы и ткани.
В зависимости от восприимчивости и штамма вируса различают 4 формы заболевания.
Острая: короткий инкубационный период, расстройство кишечника, быстрая гибель.
Подострая: поражаются органы дыхания и н/с (пневмоэнцефалит).
Хроническая: незначительные поражения кишечника и органов размножения.
Атипичная: без выраженных клинических признаков, но сопровождается выработкой антител в организме.
Источник